← Назад
Диагностика и обследования

ПЦР

Связанная статья («Молекулярные тесты: ПЦР и NGS») объясняет часть анализа крови. Эта тема подробно разбирает полимеразную цепную реакцию (ПЦР) — как она работает и почему так важна при лейкозе.

Последнее обновление: Время чтения ~1 мин
Ветвящиеся копии ДНК.
Рисунок 1.Копии удваиваются — ПЦР

01Короткий ответ

ПЦР — метод, который копирует очень маленький участок ДНК миллионы раз. Образец поочерёдно нагревают и охлаждают: нагрев разделяет две цепи ДНК, при охлаждении небольшие фрагменты — «праймеры» — связываются с мишенью, и фермент строит новую цепь. За каждый цикл копий становится вдвое больше. При лейкозе ПЦР выполняет две главные задачи: (1) показывает, есть ли конкретное изменение — например, слияние BCR::ABL1 или PML::RARA, мутация NPM1 или FLT3; (2) количественная ПЦР (qPCR) измеряет его количество. qPCR очень чувствительна и может найти одну лейкозную клетку среди 100 000 нормальных. Поэтому это главный метод при лечении ХМЛ и измерении МОБ. Для генов слияния сначала из РНК делают копию ДНК (ОТ-ПЦР).

02Простое объяснение

Копирование — миллионы раз.

Есть/нет и сколько.

Очень чувствительна — для МОБ.

03Научное объяснение

Международная шкала (IS): при ХМЛ результаты BCR::ABL1 выражают в процентах по IS для сравнения между лабораториями.

ОТ-ПЦР: гены слияния измеряют на уровне РНК, поэтому образец нужно быстро обработать.

04Что происходит в организме?

Удвоение

За каждый цикл копий целевой ДНК становится вдвое больше.

Термоциклер

Прибор точно нагревает и охлаждает образец.

Ряд пробирок в приборе.
Рисунок 2.Пробирки ПЦР в термоциклере.

Кривая роста

Чем больше мишени, тем раньше поднимается кривая.

S-образная кривая на экране.
Рисунок 3.Кривая амплификации ПЦР.

05Цикл ПЦР

Четыре шага.

Матрица — Образец ДНК.1МатрицаОбразец ДНК.
Нагрев — Цепи разделяются.2НагревЦепи разделяются.
Праймеры — Связываются с мишенью.3ПраймерыСвязываются с мишенью.
Копии — Удвоение.4КопииУдвоение.

06Применение ПЦР при лейкозе

ЦельПример
ДиагнозPML::RARA (ОПЛ), BCR::ABL1
МутацияNPM1, FLT3 (ОМЛ)
КоличествоBCR::ABL1 IS (ХМЛ)
МОБСлияние или индивидуальная мишень
Выявление рецидиваПовторный рост количества

07Ключевые термины

ПЦР
Полимеразная цепная реакция.
Праймер
Короткий кусочек ДНК, узнающий мишень.
qPCR
Количественная ПЦР.
ОТ-ПЦР
ПЦР, начинающаяся с РНК.
IS
Международная шкала.

08Главное

  • ПЦР копирует ДНК.
  • Показывает, есть ли изменение.
  • qPCR измеряет количество.
  • Очень чувствительна.
  • Основа при ХМЛ и МОБ.
  • Следите за динамикой с врачом.

09Частые вопросы

«Не обнаружено» — значит, лейкоза совсем нет?

Нет; это значит, что уровень ниже порога чувствительности теста. Смысл объяснит врач.

Небольшой рост — тревожно?

Важно не одно измерение, а динамика; решит врач.

Почему образец надо доставить быстро?

РНК быстро разрушается.

10Вопросы врачу

Возьмите эти вопросы на приём. Сохранённые собираются на странице «Мои вопросы» и остаются только на этом устройстве.

  1. «Не обнаружено» — значит, лейкоза совсем нет?

  2. Небольшой рост — тревожно?

  3. Почему образец надо доставить быстро?

Мои вопросы

12Источники

  1. National Cancer Institute (NCI). Definition: polymerase chain reaction
  2. MedlinePlus Genetics. What is a gene variant and how do variants occur?
  3. National Cancer Institute (NCI). CML treatment (PDQ), patient version
  4. American Cancer Society. Treatment of Acute Promyelocytic Leukemia (APL)
  5. Cleveland Clinic. Differentiation Syndrome: Symptoms, Causes & Treatment
  6. National Cancer Institute (NCI). Chronic Myeloid Leukemia Treatment (PDQ®) — Health Professional Version
  7. World Health Organization. Childhood cancer — Fact sheet
  8. National Cancer Institute (NCI). Cancer in Children and Adolescents — Fact Sheet
  9. Blood (American Society of Hematology), 2021. 2021 Update on MRD in acute myeloid leukemia: a consensus document from the European LeukemiaNet MRD Working Party
  10. Blood (American Society of Hematology), 2022. International Consensus Classification of Myeloid Neoplasms and Acute Leukemias: integrating morphologic, clinical, and genomic data
Медицинское предупреждениеЭта информация предназначена только для ознакомления и не заменяет консультацию врача.
Последнее обновление: ← Вернуться к списку

Открыть интерактивную версию сайта →