Диагностика и обследования

FISH

Связанная статья («Цитогенетика: кариотип и FISH») объясняет анализ крови. Эта тема подробно разбирает тест флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) — как он работает, когда его выбирают и как читают результат.

Последнее обновление: Время чтения ~1 мин
Цветные точки на тёмном фоне.
Рисунок 1.Красные и зелёные точки в ядре.

01Короткий ответ

FISH — тест, который находит конкретный участок ДНК в ядре клетки с помощью светящихся флуоресцентных «зондов». Зонд — небольшой кусочек ДНК, соответствующий искомому участку гена, с цветной меткой. В нормальной клетке для каждого гена обычно видны две точки. При транслокации две точки разного цвета сливаются (например, красная и зелёная дают жёлтую); при делеции точек меньше; при лишней хромосоме — больше. FISH работает и на неделящихся клетках, и результат готов быстро — иногда за один-два дня. Поэтому его используют для срочных вопросов, таких как t(15;17) при ОПЛ или BCR::ABL1 при ХМЛ/ОЛЛ, а при ХЛЛ — для панели del(17p), del(11q), +12, del(13q).

02Простое объяснение

Светящиеся зонды находят конкретный ген.

Точки подсчитывают.

Быстро и без деления клеток.

03Научное объяснение

Зонды разрыва и слияния: «break-apart» показывают разрыв гена, «dual-fusion» — слияние двух генов.

Ограничение: FISH смотрит только выбранную мишень; для неожиданных изменений нужны кариотип или молекулярные тесты.

04Что происходит в организме?

Красные и зелёные точки

В нормальном ядре для каждого зонда видны две отдельные точки.

Жёлтое слияние

Слияние двух генов выглядит как наложение цветов.

Слившаяся красно-зелёная точка.
Рисунок 2.Жёлтый сигнал слияния.

Зонд находит мишень

Зонд связывается только с подходящим кусочком ДНК.

Светящийся зонд на ДНК.
Рисунок 3.Зонд находит мишень.

05Как проводят FISH

Четыре шага.

Фиксация — Ядра на стекле.1ФиксацияЯдра на стекле.
Зонд — Добавляют цветной зонд.2ЗондДобавляют цветной зонд.
Связывание — Соединяется с ДНК.3СвязываниеСоединяется с ДНК.
Подсчёт — Считают точки.4ПодсчётСчитают точки.

06Примеры FISH

ЛейкозИскомое изменение
ОПЛt(15;17) — PML::RARA
ХМЛ, Ph+ ОЛЛt(9;22) — BCR::ABL1
ХЛЛdel(17p), del(11q), +12, del(13q)
ОМЛПерестройка KMT2A, inv(16)
ОЛЛETV6::RUNX1, KMT2A

07Ключевые термины

FISH
Флуоресцентная гибридизация in situ.
Зонд
Кусочек ДНК с цветной меткой.
Сигнал
Светящаяся точка в микроскопе.
Слияние
Соединение двух генов.
Интерфаза
Фаза неделящейся клетки.

08Главное

  • FISH ищет конкретное изменение.
  • Работает и на неделящихся клетках.
  • Результат быстрый.
  • Особенно полезен при ОПЛ и ХМЛ.
  • При ХЛЛ используют панель.
  • Показывает только искомое.

09Частые вопросы

Можно ли делать FISH из крови?

Да, если в крови достаточно лейкозных клеток.

Что значит процент?

Доля клеток с изменением; смысл объяснит врач.

Заменяет ли FISH кариотип?

Нет, они дополняют друг друга («Кариотип»).

10Вопросы врачу

Возьмите эти вопросы на приём. Сохранённые собираются на странице «Мои вопросы» и остаются только на этом устройстве.

  1. Можно ли делать FISH из крови?

  2. Что значит процент?

  3. Заменяет ли FISH кариотип?

Мои вопросы

12Источники

  1. National Cancer Institute (NCI). Definition: FISH
  2. National Cancer Institute (NCI). Definition: cytogenetic analysis
  3. National Cancer Institute (NCI). CLL treatment (PDQ), patient version
  4. National Cancer Institute (NCI). Hairy Cell Leukemia Treatment (PDQ®) — Health Professional Version
  5. American Cancer Society. Phases of Chronic Myeloid Leukemia
  6. NHS. Symptoms of acute myeloid leukaemia
  7. NHS. Symptoms of acute lymphoblastic leukaemia
  8. NHS. Symptoms of chronic lymphocytic leukaemia
  9. NHS. Symptoms of chronic myeloid leukaemia
  10. American Cancer Society. Signs and Symptoms of Childhood Leukemia
Медицинское предупреждениеЭта информация предназначена только для ознакомления и не заменяет консультацию врача.
Последнее обновление: ← Вернуться к списку